北五味子藤茎的化学成分研究

　　摘要:目的研究北五味子藤茎的化学成分。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,并结合化合物的理化性质与波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物,分别鉴定为去氢二异丁香酚(dehydrodiisoeugenol)(Ⅰ); 关键词:北五味子;　化学成分;　结构鉴定　　 北五味子藤茎为五味子科植物五味子Schisandra chinensis (Turcz. )Bail.l的干燥藤茎,具有很好的保健、调味功能。北五味子的干燥成熟果实为临床常用的滋补性中药,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。近年来发现北五味子具有抗氧化、抗肿瘤、抗衰老,抗HIV-1等多种生物活性。同时一些学者研究表明,北五味子藤茎含有与北五味子果实相似的化学组成成分,为了补充和丰富该植物的研究内容,在此对北五味子的藤茎进行了深入的化学分析,从其70%丙酮提取物中分离鉴定了6个化合物,通过对它们的理化性质及光谱数据进行分析,确证了各个单体的结构,分别为去氢二异丁香酚( dehydrodii- soeugenol)(Ⅰ);Eriobofuran(Ⅱ); 4, 5-Dihydroxy-3-methoxybi- phenyl(Ⅲ);Gomisin N(Ⅳ); (+)deoxyschizandrin(Ⅴ);β-谷甾醇(β- Sitosterol)(Ⅵ)。 1　仪器与材料 RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);DZF-150 性数显小型恒温真可干燥箱(郑州长城科工贸有限公司); ZF-C 型三用紫外分析仪(上海康和光电仪器有限公司); BS124S电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司);Varian - INOVA - 400FT 型核磁共振仪(1H-NMR 400MHz, 13C-NMR 100 MHz), TMS 为内标(美国Varian公司);QPZ010型精密显微熔点测定仪(北京福容凡科技发展有限公司,温度计未校正)。层析柱及薄层层析用硅胶均为青岛海洋化工厂生产, Sepha- dex LH-20为Pharmacia公司生产。所用试剂均为分析纯。药材采自吉林省长春市,经沈阳药科大学生药教研室李玉山教授鉴定为北五味子Schisandra chinensis(Turcz. )Bail.l的藤茎。 2　方法与结果 2. 1　提取与分离取北五味子藤茎24 kg(湿品),用70%丙酮溶液冷浸提取4次,每次24 h,冷浸液减压浓缩得浸膏800g,用蒸馏水水混悬,依次用石油醚(60~90℃),醋酸乙酯反复萃取。醋酸乙酯萃取液减压回收溶剂,得萃取物170g,取醋酸乙酯萃取物通过硅胶柱色谱,以一定比例的石油醚(60~90℃)-丙酮洗脱,得到9部分,部分2通过反复硅胶柱色谱,得到化合物Ⅰ(15 mg), Ⅱ(14 mg),Ⅲ(18 mg);部分6通过反复硅胶柱色谱与Sephadex LH-20凝胶柱色谱,得到化合物Ⅳ(720 mg),Ⅴ(50 mg),Ⅵ (420 mg)。 2. 2　结构鉴定 2. 2. 1　化合物Ⅰ白色结晶(石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯), mp: 134~136℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,表示结构中有酚羟基。1H-NMR(CDCl3, 400MHz)δ: 5. 10(1H, d,J=9. 4 Hz,H -2), 3. 45(1H, dd,J=6. 8, 9. 4 Hz,H-3), 6. 77(1H, brs,H- 4), 6. 79(1H, brs,H-6), 6. 88(1H, d,J=8. 3,H-5′), 6. 91(1H, brd, J=8. 3,H-6′)和6. 97(1H, brs,H-2′), 1. 87(3H, dd,J= 1. 5, 6. 4 Hz,γ-H)和6. 36(1H, dd,J=15. 7, 1. 5 Hz,α-H), 6. 11(1H, dd,J=15. 7, 6. 4 Hz,β-H), 1. 38(1H, d,J=6. 8, 3- CH3), 3. 88(3H, s, 7 -OCH3), 3. 90 (3H, s, 3′-OCH3);13C- NMR(CDCl3, 100MHz)δ: 93. 8(C-2), 45. 6(C-3), 133. 2(C- 3a), 113. 3(C-4), 132. 2(C-5), 109. 2(C-6), 144. 1(C-7), 146. 6(C-7a), 132. 1(C-1′), 108. 9(C-2′), 146. 7(C-3′), 145. 8(C-4′), 114. 0(C-5′), 120. 0(C-6′), 130. 9 (C-α), 123. 5(C-β), 18. 4(C-γ), 17. 5(CH3-3), 56. 0(OCH3-3′), 56. 0(OCH3-7′),以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物为去氢二异丁香酚(dehydrodiisoeugenol)。 2. 2. 2　化合物Ⅱ白色结晶(石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯), 三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,表示结构中有酚羟基。1H-NMR (DMSO-d6, 400MHz)δ: 7. 44(1H, s,H-1), 7. 63(1H, d,J=8. 0 Hz,H-6), 7. 39(1H, dd,J=7. 2, 8. 0 Hz,H-7), 7. 33(1H, dd,J =7. 2, 7. 6 Hz,H-8), 7. 99(1H, d,J=7. 6 Hz,H-9), 3. 91(3H, s, 2-OCH3), 4. 02(3H, s, 4-OCH3)。13C-NMR(DMSO-d6, 100MHz)δ: 97. 9(C-1), 146. 2(C-2), 139. 4(C-3), 133. 1(C -4), 143. 0(C-4a), 155. 3(C-5a), 111. 3(C-6), 125. 5(C- 7), 122. 2(C-8), 120. 0(C-9), 124. 6(C-9a), 114. 3(C-9b), 56. 5(OCH3-2), 60. 4(OCH3-4)以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物为Eriobofuran。 2. 2. 3　化合物Ⅲ黄色油状物,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性表明含有酚羟基。1H-NMR(DMSO-d6, 400 MHz)δ: 7. 55(2H, d,J =7. 6,H-2′, 6′), 7. 39(2H, dd,J=7. 6, 8. 0 Hz,H-3′, 5′), 7. 26 (1H, t,J=8. 0 Hz,H-4′), 6. 71(1H, d,J=2. 0 Hz,H-2), 6. 80 (1H, d,J=2. 0 Hz,H-6), 3. 95(3H, s, 3-OCH3)。13C-NMR (DMSO-d6, 100MHz)δ: 130. 6(C-1), 102. 2(C-2), 148. 7(C -3), 134. 0(C-4), 146. 1(C-5), 107. 4(C-6), 140. 6(C- 1′), 126. 1(C-2′, 6′), 128. 6(C-3′, 5′), 126. 4(C-4′), 55. 9 (OCH3-3)以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物为 4, 5- Dihydroxy-3-methoxybiphenyl。 2. 2. 4　化合物Ⅳ无色柱晶(氯仿),mp: 104~106℃, [α]D25= +98. 8°(c 0. 216, CHCl3)。香草醛-浓硫酸显色后鲜黄色。1H -NMR(CDCl3, 400MHz)δ: 66. 55(1H, s,H-4), 2. 57(1H, dd,J =13. 2, 7. 2 Hz,H-6a), 2. 51(1H, dd,J=13. 2, 2. 0 Hz,H-6b), 1. 79(1H,m,H-7), 1. 89(1H,m,H-8), 2. 21(1H, dd,J=13. 2, 7. 2 Hz,H-9a), 2. 02(1H, brd,J=13. 2 Hz,H-9b), 6. 48(1H, s, H-11), 0. 72(3H, d,J=7. 0 Hz,H-17), 0. 97(3H, d,J=7. 0Hz, H-18), 3. 55(3H, s, -OCH3), 3. 82(3H, s, -OCH3), 3. 87(3H, s, -OCH3), 3. 89(3H, s, -OCH3), 5. 94(1H, s, -OCH2O-), 5. 95(1H, s, -OCH2O-)。13C-NMR(CDCl3, 100 MHz)δ: 151. 5 (C-l), 140. 0(C-2), 151. 6(C-3), l10. 6(C-4), 134. 1(C- 5), 39. 1(C-6), 33. 4(C-7), 40. 6(C-8), 35. 5(C-9), 137. 8 (C-10), 102. 9(C-11), 148. 6(C-12), 134. 5(C-13), 141. 0 (C-14), 121. 3(C-15), 123. 2 (C-16), 12. 8(C-17), 21. 5(C -18), 61. 0(-OCH3), 60. 5(-OCH3), 59. 6(-OCH3), 55. 8(- OCH3), 100. 7(-OCH2O-),以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物Gomisin N。 2. 2. 5　化合物Ⅴ白色片状结晶(环己烷-醋酸乙酯),mp: 114 ~115℃, [α]D25= + 1. 0°(c 1. 0, CHCl3)。香草醛-浓硫酸显色后鲜黄色。1H-NMR(CDCl3, 400 MHz)δ: 6. 53(2H, s,H-4, 11), 2. 59(1H, dd,J=13. 6, 7. 2 Hz,H-6a), 2. 49(1H, d,J=13. 6 ,H-6b), 1. 80(1H,m,H-7), 1. 89(1H,m,H-8), 2. 28(1H,m, H-9a), 2. 05(1H, brd,J=13. 2 Hz,H-9b), 6. 53(1H, s,H- 11), 3. 58(6H, s, -OCH3), 3. 86(3H, s, -OCH3), 3. 87(3H, s, - OCH3), 3. 88(3H, s, -OCH3), 3. 92(3H, s, -OCH3)。13C-NMR (CDCl3, 100MHz)δ: 152. 8(C-l), 140. 1(C-2), 151. 6(C-3), 110. 5(C-4), 139. 1(C-5), 35. 6(C-6), 40. 7(C-7), 33. 7(C -8), 39. 1(C-9), 33. 7(C-10), 110. 5(C-11), 151. 5(C- 12), 139. 7(C-13), 151. 4(C-14), 123. 4(C-15), 122. 3(C- 16), 12. 6(C-17), 21. 7(C-18), 60. 9x2(-OCH3), 60. 6x2(- OCH3), 55. 9x2(-OCH3),以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物五味子甲素[(+)deoxyschizandrin)]。 2. 2. 6　化合物Ⅵ白色针晶(氯仿),mp: 135~137℃。香草醛- 浓硫酸显红色。1H-NMR(CDCl3, 400 MHz)δ: 5. 34(1H, d,J= 7. 2 Hz,H-6), 3. 52(1H, m,H-3a), 0. 98(3H, s, CH3-19), 0. 92(3H, d,J=6. 4 Hz,CH3-26), 0. 83(3H, d,J=7. 2Hz, CH3- 21), 0. 81(3H, overlap, CH3-29), 0. 79(3H, s, CH3-27), 0. 68 (3H, s,CH3-18)。13C-NMR(CDCl3, 100 MHz)δ: 37. 3(C-l), 31. 7(C-2), 71. 9(C-3), 42. 4(C-4), 140. 8(C-5), 121. 8(C -6), 31. 9(C-7), 31. 9(C-8), 50. 2(C-9), 36. 1(C-10), 21. 1(C-11), 39. 8(C-12), 42. 3(C-13), 56. 8(C-14), 24. 3 (C-15), 28. 2(C-16), 56. 0(C-17), 11. 9(C-18), 12. 0(C- 19), 36. 1(C-20), 18. 8(C-21), 26. 1(C-22), 23. 1(C-23), 45. 8(C-24), 29. 2(C-25), 19. 4(C-26), 19. 8(C-27), 33. 9 (C-28), 19. 0(C-29),以上数据与文献数据基本一致,鉴定该化合物为β-谷甾醇(β- Sitosterol)。 3　讨论本实验从北五味子藤茎浸膏的醋酸乙酯萃取层中利用硅胶柱层析与Sephadex LH-20凝胶柱层析分离得到6个化合物,其中化合物去氢二异丁香酚(dehydrodiisoeugenol)(Ⅰ), Eriobofuran (Ⅱ), 4, 5-Dihydroxy-3-methoxybiphenyl(Ⅲ)为首次从该属植物中分离得到,为北五味子的进一步研究开发提供了依据和基础。