HPLC测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素E的含量_药学论文

    【摘要】  目的 建立测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素e含量的方法。方法 采用hplc法,色谱柱为agilent zorbax ods柱,甲醇惨译(体积比25∶75)为流动相,流速1.0 ml/min, 检测波长290 nm,柱温为40 ℃。结果 维生素e在32.9~291.1 μg/ml范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.9%,rsd为1.0%(n=6)。结论 本文方法简便、准确,能有效地控制该制剂的质量。
    【关键词】  小麦胚芽油营养胶囊;维生素e;高效液相色谱法
    abstract:objective to establish an hplc method for determining the content of vitamin e in wheat germ oil. methods  an agilent zorbax ods column was used to analysis the sample by using methanol瞐cetontril (25∶75) as mobile phase. the flow rate was 1.0 ml·min-1 and detective wavelength 290 nm.results  the standard curve for vitamin e was linear in the concentration range of 32.9~291.1 μg/ml. the average recovery was 99.9% with rsd 1.0% (n=6). conclusion this method is simple, accurate and reliable for the quality control of wheat germ oil.
    key words:wheat germ oil  vitamin e;  hplc
    小麦胚芽油营养胶囊是中美合作安利(中国)日用品有限公司的产品,其主要成分为不饱和脂肪酸、维生素e、胆碱、植物固醇,还有谷胱甘肽等多种微量元素,具有抗不育、抗衰老、促进人体新陈代谢、增强体力和记忆力、降低胆固醇、防治动脉硬化、改善血液循环、增强人体免疫力的功能。其主要有效成分为维生素e,测定维生素e需要将样品经过皂化、提取、洗涤、浓缩等步骤后再进行测定,操作繁琐,本文参照文献[2,3]对该制剂中维生素e含量测定方法进行研究,建立了一种简便、准确的测定方法。
    1  仪器与试剂
    岛津lc10atvp泵;spd睲10avp 检测器;cto10avp柱温箱;scl10avp 自动进样器;sil10advp系统控制器;class睼p工作站;dl拨联参生素e(dr.ehrenstorfer ca17924300,纯度98.6%);小麦胚芽油营养胶囊(由中美合作安利(中国)日用品有限公司提供,批号:2005 0217;2005 0312;2005 0326),甲醇、乙腈为色谱纯。
    2  实验部分
    2.1  溶液的制备
    2.1.1  对照品溶液的制备  精密称取dl拨联参生素e对照品适量,加甲醇制成每1 ml含100 μg溶液,即得。
    2.1.2  供试品溶液的制备  取小麦胚芽油营养胶囊装量差异项下的内容物,混匀,取0.2 g,精密称定,置20 ml棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,摇匀,精密吸取2 ml至10 ml棕色容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过(0.45 μm),即得。
    2.2  色谱条件及系统适应性试验色谱柱为ods柱(agilent zorba,250 mm×46 mm,5 μm),流动相为甲醇惨译(体积比25∶75),流速为1 ml/min ;检测波长为 290 nm;柱温为40 ℃。分别取对照品溶液、供试品溶液各10 μl注入色谱仪,见图1。
    a.对照品; b.样品; c.阴性对照
    图1  hplc色谱图(略)
    fig.1  hplc chromatograms
    2.3  线性关系考察以维生素e对照品溶液(109.5446 μg/ml)各分别进样3、5、10、15和20 μl进行测定,以质量浓度(ρ)为横坐标,峰面积(a)为纵坐标,绘制标准曲线得回归方程:a=4 042.79ρ-19 368.6,r=0.999 9。结果表明,维生素e在32.9~219.1 μg/ ml范围内,其进样量与峰面积呈良好的线性关系。
    2.4  精密度试验取同一对照品溶液(109.5446 μg/ml),重复进样6次,结果维生素e平均峰面积为423 530,rsd为0.39%。
    2.5  重现性试验取同一批样品(批号20050217)6份,按“212”项方法制备供试品溶液并测定,结果维生素e的平均含量为18.1 mg/粒,其rsd为0.82%。
    2.6  稳定性试验取同一供试品(批号20050217)溶液,分别于0、2、4、8、16、24 h进样10 μl,测定峰面积,结果其rsd为0.88%,表明供试品溶液在24 h内稳定。
    2.7  加样回收率试验精密称取已知含量的小麦胚芽油营养胶囊(批号20050217),取内容物约0.1 g,精密称定,共6份,分别精密加入对照品溶液(546.65 μg/ml)10 ml,置20 ml棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,摇匀,精密吸取2 ml至10 ml棕色容量瓶中,加甲醇置刻度,密塞,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液作为供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,结果见表1。
    表1  维生素e回收率试验结果(略)
    tab.1  recovery of vitamin em
    2.8  样品测定取小麦胚芽油营养胶囊3批,照“212”项方法制备供试品溶液,分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl,按上述色谱条件测定,计算,结果3个批号2005 0217、2005 0312、2005 0326的样品维生素e含量分别为18.1、18.2和180 mg/粒。
    3  讨论
    3.1  研究结果显示,本文方法具有较好的线性关系、重复性与回收率,操作方便、迅速,结果准确。说明hplc法测定小麦胚芽油营养胶囊中维生素e含量的可行性良好。
    3.2  维生素e容易氧化,操作过程应注意避光,使用棕色容量瓶。
    【参考文献】
    王叔淳,王荫国.强化食品中维生素a、d、e、k同时测定方法的研究[j].中华预防医学杂志,1995,29(6):379-380.
    沈颖.反相高效液相色谱法测定易善力软胶囊中维生素e的含量[j].兰州大学学报,2003,23(3):319-320.
    吴虹,吴健.反相高效液相色谱法测定易沙棘油中维生素e的含量[j].安徽中医学院学报,2002,21(1):47.